Институт Ветеринарной Биологии 232-55-92

УДК 619:615.038

БИОХИМИЧЕСКАЯ И КЛИНИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА ЭФФЕКТИВНОСТИ ПРЕПАРАТА ГЕПАКАРДИН НА СОБАКАХ СТАРШЕЙ ВОЗРАСТНОЙ ГРУППЫ

Чуваев И.В. (Главный врач, Институт Ветеринарной Биологии, к.б.н)

 Глотова С.В. (врач-терапевт, Институт Ветеринарной Биологии, к.в.н.),

 Андреева Н.Л. (зав. кафедрой фармакологии и токсикологии СПбГАВМ, д.б.н., проф. ).

Журнал: АКТУАЛЬНЫЕ ПРОБЛЕМЫ ГУМАНИТАРНЫХ И ЕСТЕСТВЕННЫХ НАУК    № 5 2012, С. 39-44 

Аннотация

Использование препарата Гепакардин ( 30 дней в дозе 500 мг на 10 кг массы тела, два раза в день, внутрь) собакам в возрасте 10-14 лет, с различными заболеваниями сердца, печени, костно-суставной системы, приводило  к нормализации в сыворотке крови активности АЛТ, АСТ, щелочной фосфатазы; снижало до нормальных значений содержание билирубина, малонового диальдегида, диенкитонов. В значительной степени улучшалась двигательная активность животных c артрозо-артритными поражениями суставов.

Ключевые слова: гепакардин, ветеринарная гериатрия, гепатопротектор, кардиопротектор, антиоксидант

Keywords: hepacardin, veterinary geriatrics, hepatoprotector, cardioprotector, antioxidant

Введение

За последние годы возросло относительное число посетителей ветеринарных клиник с собаками старшей возрастной группы, т.е. с собаками в возрасте от 8 лет и старше [10 ]. В связи с этим, разработка и создание гериатрических препаратов для домашних животных становиться актуальной задачей ветеринарной фармакологии. Препараты данной группы позволят не только комплексно профилактировать и лечить болезни, возникающие в старости, но и продлевать срок активной и полноценной жизни животных [9].

Ранее, был разработан и создан препарат Гепакардин (ЧИН 3607), включающий в себя экстракты растительного и животного происхождения. Доклинические исследования свойств препарата выявили его высокую безопасность [3] и эффективность на различных моделях поражения печени и миокарда [4, 8, 11 ]. Кроме того, учитывая свойства компонентов, входящих в состав препарата, предполагается выраженный хондропротекторный эффект. Учитывая комплексное воздействие препарата на организм животного, гепато- и кардиопротекторные свойства доказанные в процессе доклинических испытаний, на наш взгляд было целесообразно провести изучение эффективности препарата в условиях естественных патологических состояний характерных для животных старшей возрастной группы.

Цель исследования: биохимическая и клиническая оценка действия препарата гепакардин применяемого для лечения собак старшей возрастной группы с различными заболеваниями сердца, печени, опорно-двигательного аппарата.

Материалы и методы

Исследование было выполнено на базе приюта для собак г. Санкт – Петербурга, ветеринарной клиники Института Ветеринарной Биологии, СПбГАВМ с 2008 по 2009 годы. В исследовании принимали участие  10 собак, в возрасте 10-14 лет; среди них 4 суки и 6 кобелей, все беспородные. Собаки в течение всего периода наблюдения содержались в одинаковых условиях, получали готовый сухой корм.

Гепакардин задавали вместе с кормом, из расчета 500 мг на 10 кг живой массы, 2 раза в день, в течение месяца. Полный клинический осмотр животных, клинический анализ крови и контроль биохимических показателей крови проводили на момент начала и окончания исследования.

Оценку биохимических показателей крови, таких как АЛТ, АСТ, щелочная фосфатаза, креатинин, общий билирубин, общий белок, кальций и фосфор осуществляли колориметрическим методом с использованием биохимического анализатора Stat Fax 1904 Plus (США) и стандартных наборов импортного и отечественного производства.

Уровень перекисного окисления липидов оценивали по концентрации малонового диальдегида (методом с тиобарбитуровой кислотой) , а так же по концентрации диеновых конъюгатов и диенкетонов, которые определяли модифицированным методом Плацера с соавтор. [5] на кафедре биохимии СПбГАВМ.

Полученные результаты обрабатывали статистически с использованием критерия Стъюдента. Поведение животных, аппетит и потребление воды контролировали ежедневно.

Результаты и обсуждение

Результаты клинического осмотра животных на момент начала исследования:

1. У всех собак был хороший аппетит, стул оформленный, отсутствовали признаки обезвоживания, а так же полидипсии – полиурии.

2. Упитанность собак № 1,5,6,7,8,9 - нормальная; № 2,3,4 - ожирение; № 10 – понижена.

3. Состояние шерстного покрова: у собак № 2,3,4,5 отмечена жирная себорея; у остальных – нормальное.

4. Цвет слизистых оболочек у собаки № 2 и 5 иктеричный, у остальных животных – розового цвета.

5. При аускультации грудной полости у собак № 1,5,7,8,10 были выявлены глухие сердечные тоны, у № 5,6,9,10 аритмия, у № 1, 10 сердечный шум.

6. Дыхание у всех собак при аускультации было везикулярным .

7. При пальпации брюшной полости болезненность в области почек была выявлена у собаки № 1 , болезненность в области печени у собак № 2,5, 10, увеличение границ печени у собак № 2,3 и 5.

8. У собаки № 7 была выявлена сильная болезненность и крепитация при движении левого скакательного сустава, клинические признаки остеоартроза.

Болезненность при движении суставов, скованность в движениях, периодическая хромота были отмечены у всех собак испытуемый группы и квалифицировались как артрозо- артритные изменения.

Результаты биохимического и клинического анализов крови на момент начала исследования:

Результаты анализов крови собак наблюдаемой группы представлены в таблице 1 и 2.

Анализируя результаты биохимических исследований (на начало испытания), представленные в таблице 1, следует отметить значительное увеличение активности АЛТ, щелочной фосфатазы и концентрации билирубина в сыворотке крови данной группы животных, что может свидетельствовать о нарушении целостности, а следовательно и функции гепатоцитов (внутри- и внепеченочный холестаз, токсические поражения гепатоцитов, недостаточность синтетических процессов в печени, воспалительные процессы, а так же возрастные изменения в паренхиме органа).

При этом следует отметить, что значительное увеличение биохимических показателей характеризующих состояние печени было не только по суммарно среднему значению всей выборки животных, но и у каждого животного в отдельности:

- уровень АЛТ в сыворотке крови животных на момент начала испытания только у двух собак в пределах нормы (до 70 Е/л), у шести собак - от 70 до 100 Е/л, у двух собак выше 100 Е/л; в целом по группе уровень АЛТ составил от 67,3 до 282,8 Е/л;

- уровень щелочной фосфатазы в сыворотке крови животных на момент начала испытания у всех собак был больше нормы (выше 120 Е/л) – от 163,7 до 434,6 Е/л;

- уровень общего билирубина в сыворотке крови животных на момент начала испытания в пределах нормы был лишь у двух собак (до 8 мкмоль/л), у пяти собак – от 8 до 15 мкмоль/л и у трех – выше 15 мкмоль/л; в целом по группе уровень общего билирубина составил от 7,1 до 31,2 мкмоль/л.

- уровень АСТ на момент начала исследования у семи собак был выше нормы (больше 70 Е/л) : у трех – от 70 до 100 Е/л и у четырех – от 100 до 250 Е/л; в целом по группе уровень АСТ составил от 62,3 до 250 Е/л. Наиболее высокая активность АСТ отмечена в печени, нервной ткани, скелетной мускулатуре, миокарде. При инфаркте миокарда активность АСТ в 95% случаев повышена в первую неделю после приступа. Активность данного фермента значительно повышается также при заболеваниях гепатобилиарной системы и повреждениях скелетной мускулатуры.

- уровень кальция и фосфора в сыворотке крови у большинства животных был в пределах нормы: Са – от 1,9 до 2,4 ммоль/л; Р - у восьми животных 2,0-3,0 ммоль/л, а двух собак выше нормы – 3,0- 4,9 ммоль/л. Повышение уровня фосфора в сыворотке крови может говорить о остеопорозе, деструкции костной ткани, а так же о деструктивных процессах в печени, о почечной недостаточности.

Обмен фосфора и кальция тесно взаимосвязаны и при оценке уровня кальция и фосфора в крови следует обращать внимание не только на их количество в крови, но и на их соотношение. Считается [7], что оптимальным является соотношение между кальцием и фосфором (Са:Р) равное 1,5:1. Гиперкальциемия, снижая секрецию паратиреоидного гормона, стимулирует реабсорбцию фосфатов. Фосфат может соединяться с кальцием и приводить к отложению кальция в тканях и гипокальциемии.

На момент начала исследования соотношение Са:Р в сыворотке крови в среднем составляло 1: 1,25, что может свидетельствовать о нарушение кальце-фосфорного обмена.

Показатели перекисного окисления липидов (ПОЛ) – малоновый диальдегид и диенкетоны в сыворотке крови собак на момент начала испытания были выше нормы (более 20 мкмоль/л и 0,1 едА/мл соответственно); в целом по группе уровень малонового диальдегида составил от 22,5 до 40,0 мкмоль/л, а уровень диенкетонов – от 0,14 до 0,3 едА /мл. Увеличение концентрации маркеров перекисного окисления липидов – малонового диальдегида и диенкетонов происходит с возрастом [1], что связано с ослаблением антиоксидантной защиты организма (снижение уровня витаминов С,Е,А, а также активности ферментов- антиоксидантов - супероксиддисмутазы и каталазы).

Так же известно, что в условиях кислородного голодания тканевых структур происходит перестройка внутриклеточного метаболизма с ограничением аэробных и преобладанием анаэробных процессов, при этом активируется протеолиз, развивается внутриклеточный ацидоз, которые, в свою очередь, вызывают повреждения цитомембран, сопровождающиеся инициацией перекисного окисления липидов [6] и накоплением в жидких средах его продуктов: малонового диальдегида, диеновых и триеновых конъюгатов, гидроперекисей липидов, диенкетонов [2]. Таким образом, повышение этих веществ в сыворотке крови может указывать на наличие метаболических нарушений в различных органах и тканях организма (в сердце, печени, мускулатуре и т.д.).

Показатели клинического анализа крови животных, проведенного в начале исследования, были в пределах нормы : уровень эритроцитов был в диапазоне 4,6 – 6,8, лейкоцитов – 8,1 – 18,7, гемоглобин – 127,7 – 247,2 г/л, цветной показатель – 0,9 – 1,3, СОЭ – 1-6 мм/ч.

Клинический осмотр животных на момент окончания исследования:

1. В период проведения испытания аппетит у всех собак оставался хороший, стул оформленный, признаков полидипсии – полиурии не наблюдалось.

2. Были отмечены изменения в поведении - собаки стали более активные, подвижные.

3. Слизистые оболочки у всех собак при вторичном осмотре были розового цвета.

4. У собак № 2,3,4,5 отмечено улучшение состояние шерстного покрова, отсутствие себореи.

5. Упитанность у всех собак осталась прежняя.

6. Состояние сердца при аускультации у собак осталось без явных изменений, за исключение животных № 5,6, у которых отмечено стабилизация ритма сердечных тонов.

7. При пальпации брюшной стенки, болезненности в области печени, почек у собак не выявлено. Границы печени у собаки № 3 остались на прежнем уровне.

8. Улучшение опорной и динамической функций конечностей наблюдалось у всех собак.

Результаты биохимического и клинического анализов крови на момент окончания исследования:

Результаты повторного клинического и биохимического анализов крови собак представлены в таблице 1,2.

Таблица № 1.

Некоторые биохимические показатели крови собак на момент начала и окончания приема гепакардина (N+_n)

 

Таблица № 2.

Показатели клинического анализа крови собак (среднее значение) на момент начала и окончания приема гепакардина

 

 

Как представлено в табл. 1, применение препарата гепакардин в дозе 500 мг/10кг массы, 2 раза в день, привело к снижению до нормальных значений таких показателей крови наблюдаемых животных как: АЛТ, АСТ, щелочная фосфатаза, общий билирубин. Этот факт свидетельствовать о наличии гепатопротекторного и кардиопротекторного действия препарата и соответственно о восстановлении целостности и функции гепатоцитов и возможно, кардиомиоцитов.

Так, при повторном взятии крови, на момент окончания исследования было установлено:

- уровень АЛТ в сыворотке крови испытуемых животных снизился практически до нормы (до 70 Е/л) у 7 собак, в пределах от 70 до 101,0 Е/л – у трех собак; в среднем по группе уровень АЛТ снизился на 46,4% от исходного значения;

- уровень щелочной фосфатазы в сыворотке крови так же снизился практически до нормы (до 120 Е/л) у 6 собак, в у остальных четырех - стал в пределах от 120 до 198,5 Е/л; в среднем по группе уровень щелочной фосфатазы снизился на 49,5% от исходного значения;

- уровень общего билирубина в сыворотке крови стал в пределах нормы (до 8 мкмоль/л) у 8 собак, однако у двух оставался немного повышенным (до 13,7 мкмоль/л); в среднем по группе уровень общего билирубина снизился на 55,29% от исходного значения;

- уровень АСТ в сыворотке крови у всех животных стал в пределах нормы (до 70 Е/л); в среднем по группе уровень АСТ снизился на 75,9% от исходного значения.

Наблюдаемые изменения биохимических показателей крови, могут свидетельствовать о гепато- и кардиопротекторном действии препарата гепакардин и соответственно о нормализации функции сердца и печени у собак старшей возрастной группы.

Уровень креатинина и общего белка в течение исследования достоверно не изменились и остались в переделах нормы.

Содержание кальция в крови собак через месяц применения препарата гепакардин увеличилось на 15,5 % по сравнению с начальным уровнем. В связи с этим, данный препарат, видимо можно рекомендовать в качестве дополнительного источника кальция для животных. Кроме того, изменилось соотношение Са:P - 1,25 : 1 соответственно, что может говорить о нормализации кальций–фосфорного обмена у животных.

Содержание в крови собак малонового диальдегида и диенкетонов (продукты перекисного окисления липидов в организме) достоверно снизилось и приблизилось к нормальным значениям:

- уровень малонового диальдегида в сыворотке крови испытуемых животных стал в пределах нормы (до 20 мкмоль/л) у трех собак, а у остальных данный показатель оказался в пределах до 27,8 мкмоль/л; в среднем по группе уровень малонового альдегида снизился на 26,2% от исходного значения;

- уровень диенкетонов в сыворотке крови испытуемых животных стал в пределах 0,09 – 0,2 едА/мл); в среднем по группе уровень диенкетонов снизился на 35% от исходного значения.

Снижение концентрации в крови продуктов перекисного окисления липидов может говорить о высокой антиоксидантной активности препарата гепакардин, связанной скорее всего со свойствами компонентов, входящих в состав препарата, способных повысить уровень антиоксидантной защиты организма.

Показатели клинического анализа крови собак на момент начала и окончания испытания существенно не отличались и оставались в пределах физиологической нормы.

Выводы

1. Тридцатидневный курс применения препарата Гепакардиин в терапевтической дозе (500 мг на 10 кг живой массы, 2 раза в день ) способствует восстановлению опорных и двигательных функций конечностей собак, больных остеоартрозом;

2. Тридцатидневный курс применения препарата Гепакардиин в терапевтической дозе (500 мг на 10 кг живой массы, 2 раза в день) приводил к снижению в сыворотке крови уровня АСТ в 4,1 раза, АЛТ в 2 раза, щелочной фосфатазы в 1,9 раз, общего билирубина в 2,2 раза, приведя их к значениям характерным для здоровых собак.

3. Применение препарата Гепакардиин в течении месяца в терапевтической дозе (500 мг на 10 кг живой массы, 2 раза в день ) не вызывало у собак достоверных изменений уровня креатинина, общего белка в сыворотке крови.

4. Применение препарата Гепакардиин в течении месяца в терапевтической дозе (500 мг на 10 кг живой массы, 2 раза в день ) значимо не изменяло количество эритроцитов, лейкоцитов, уровень гемоглобина, цветной показатель, СОЭ крови испытуемых животных.

5. Тридцатидневный курс применения препарата Гепакардиин в терапевтической дозе (500 мг на 10 кг живой массы, 2 раза в день ) приводило к нормализации показателей перекисного окисления липидов таких как малоновый диальдегид и диенкетоны снижая их уровень на 26,2% и на 35% соответственно.

Литература

1. Бахта А. А. Возрастные особенности антиоксидантного статуса организма собак / А. А. Бахта // Ученые записки Казанской гос. академии ветеринарной медицины им. Н. Э. Баумана. – Т. 185. – Казань, 2006. – С. 13–17.

2. Бурмистров С. О. Перикисное окисление липидов, белков и активность антиоксидантной системы сыворотки крови новорожденных и взрослых. / С. О. Бурмистров и соавт. // Акушерство и гинекология. – 1997, – № 6. – с. 36–39.

3. Глотова С. В. Изучение острой и хронической токсичности препарата ЧИН 3607 (гепакардин) / С. В. Глотова // Актуальные вопросы ветеринарной биологии. – № 2 (2). – СПб, 2009. – С. 15-18.

4. Глотова С. В. Изучение противотоксических свойств препарата ЧИН 3607 на модели острого гепатита / С. В. Глотова, И. В.Чуваев, Н. Л. Андреева // Ветеринарная практика. – № 3 (42). – СПб, 2008. – С.116-121.

5. Камышников В. С. Клинико-биохимическая лабораторная диагностика / В. С. Камышников. – Т. 1. – Минск, 2003. – С. 230.

6. Лукьянова Л. Д. Кислородзависимые процессы в клетке и ее функциональное состояние / Л. Д. Лукьянова и соавт. – М., 1982. – 301 с.

7. Смоляров В. И. Рациональное питание / В. И Смоляров. – Киев, 1991. – С. 156.

8. Чуваев И. В. Изучение гепатопротекторных свойств препарата ЧИН 3607 на модели острого гепатита / И. В. Чуваев, В. Д. Соколов, С. В. Глотова // «Эффективные и безопасные лекарственные средства». I международный конгресс ветеринарных фармакологов : [материалы]. – СПб, 2008. – 98 с.

9. Чуваев И. В. Необходимость изыскания гериатрических средств для плотоядных / И. В. Чуваев, В. Д. Соколов, С. В. Глотова // XIX Международная научно-практическая конференция по фармакологии и токсикологии : [материалы]. – СПб, 2007. – 114 с.

10. Чуваев И. В. Сравнительный анализ обращений владельцев собак в клинику ООО «Институт Ветеринарной Биологии» за 1998–2008 гг. / И. В. Чуваев, В. Д. Соколов, С. В.

Глотова // «Эффективные и безопасные средства в ветеринарии». Всероссийского съезд ветеринарных фармакологов и токсикологов : [материалы]. – 2009. – 90 с.

11. Чуваев И.В. Изучение кардиопротекторных свойств препарата гепакардин/ И.В. Чуваев, С.В.Глотова, Н.Л.Андреева// Актуальные вопросы ветеринарной биологии. – № 2 (6). – СПб, 2010. – С. 26-33.